顯微鏡是一種精密的光學儀器，已有300多年的發展史。自從有了顯微鏡，人們看到了過去看不到的許多微小生物和構成生物的基本單元——細胞。目前，不僅有能放大千余倍的光學顯微鏡，而且有放大幾十萬倍的電子顯微鏡，使我們對生物體的生命活動規律有

光學顯微鏡（英文Optical Microscope，簡寫OM）是利用光學原理，把人眼所不能分辨的微小物體放大成像，以供人們提取微細結構信息的光學儀器。

低倍鏡的使用方法

認識顯微鏡使用顯微鏡顯微鏡的結構[方法步驟]：一、認識顯微鏡的構造機械部分鏡座鏡柱鏡臂載物臺（通光孔、壓片夾）鏡筒轉換器粗準焦螺旋細準焦螺旋遮光器（光圈）反光鏡（平面鏡、凹面鏡）顯微鏡的構造光學部分目鏡:5×、10×、16×物鏡：10×、40×

取鏡和放置：顯微鏡一般存放在專門的柜或箱中，用時從柜中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實驗臺上，鏡座后端距桌邊1－2寸為宜，便于坐著操作。

使用方法： 1、將低倍鏡轉至鏡筒下方與鏡筒成一直線。 2、撥動反光鏡，調節至視野最亮無陰影。反光鏡有平、凹兩面，光源強時用平面，較暗時用凹面，需要強光時，將聚光器提高，光圈放大；需要弱光時，將聚光器降低，或光圈適當縮校 3、將待觀察

對光：用拇指和中指移動旋轉器(切忌手持物鏡移動)，使低倍鏡對準鏡臺的通光孔(當轉動聽到碰叩聲時，說明物鏡光軸已對準鏡筒中心)。打開光圈，上升集光器，并將反光鏡轉向光源，以左眼在目鏡上觀察(右眼睜開),同時調節反光鏡方向，直到視野內的光線均勻明亮為止。

顯 微 鏡 的 使 用 步 驟 ： 1. 選取最低倍數的接目鏡和接物鏡； 顯微鏡的放大率 = 接目鏡的倍數 x 接物鏡的倍數； 2. 從接目鏡望下去，調較反光鏡的角度 , 以獲得最光的視野； 3. 把玻片放在載物臺上 , 移動玻片使要觀察的物件恰好在接物鏡下；

放置玻片標本：取一玻片標本放在鏡臺上，一定使有蓋玻片的一面朝上，切記不可放反，用推片器彈簧夾夾住，然后旋轉推片器螺旋，將所要觀察的部位調到通光孔的正中。

普通光學顯微鏡的使用方法 使用方法：（一）顯微鏡的主要構造 普通光學顯微鏡的構造主要分為三部分：機械部分、照明部分和光學部分。 1.機械部分 （1）鏡座：是顯微鏡的底座，用以支持整個鏡體。 （2）鏡柱：是鏡座上面直立的部分，用以連接鏡座

調節焦距：以左手按逆時針方向轉動粗調節器，使鏡臺緩慢地上升至物鏡距標本片約5毫米處，應注意在上升鏡臺時，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側看著鏡臺上升，以免上升過多，造成鏡頭或標本片的損壞。然后，兩眼同時睜開，用左眼在目鏡上觀察，左手順時針方向緩慢轉動粗調節器，使鏡臺緩慢下降，直到視野中出現清晰的物象為止。

顯微鏡的使用步驟為：取鏡、安放、觀察。 擴展資料顯微鏡的操作方法： 1． 調節亮度：由暗調亮，可以用大光圈，凹面鏡，調節反光鏡的角度。 2． 將臨時裝片在載物臺上適當位置固定好。 3．低倍物鏡對準通光孔，使用粗準焦螺旋將鏡筒自上而下的調

如果物象不在視野中心，可調節推片器將其調到中心(注意移動玻片的方向與視野物象移動的方向是相反的)。如果視野內的亮度不合適，可通過升降集光器的位置或開閉光圈的大小來調節，如果在調節焦距時，鏡臺下降已超過工作距離(>5.40mm)而未見到物象，說明此次操作失敗，則應重新操作，切不可心急而盲目地上升鏡臺。

認識顯微鏡使用顯微鏡顯微鏡的結構[方法步驟]：一、認識顯微鏡的構造機械部分鏡座鏡柱鏡臂載物臺（通光孔、壓片夾）鏡筒轉換器粗準焦螺旋細準焦螺旋遮光器（光圈）反光鏡（平面鏡、凹面鏡）顯微鏡的構造光學部分目鏡:5×、10×、16×物鏡：10×、40×

高倍鏡的使用方法

(一)實驗時要把顯微鏡放在座前桌面上稍偏左的位置，鏡座應距桌沿6～7 cm左右。 (二) 打開光源開關，調節光強到合適大校 (三)轉動物鏡轉換器，使低倍鏡頭正對載物臺上的通光孔。先把鏡頭調節至距載物臺1～2cm左右處，然后用左眼注視目鏡內，接著

選好目標：一定要先在低倍鏡下把需進一步觀察的部位調到中心，同時把物象調節到最清晰的程度，才能進行高倍鏡的觀察。

熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區別： 1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上； 2.光源為紫外光，波長較短，分辨力高于普通顯微鏡； 3.有兩個特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線，用以保護人

轉動轉換器，調換上高倍鏡頭，轉換高倍鏡時轉動速度要慢，并從側面進行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片)，如高倍鏡頭碰到玻片，說明低倍鏡的焦距沒有調好，應重新操作。

在光學顯微鏡的樣品制備過程中，樣品的切片厚度在2～25um之間；電鏡的切片厚度在50-100nm以內（高壓電鏡除外，其樣品厚度可達到1um），所以采用的切片方法，也不盡相同。 在載體方面，光學顯微鏡的的切片的載體是玻片，而電鏡切片的載體是載網。

調節焦距：轉換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察，此時一般能見到一個不太清楚的物象，可將細調節器的螺旋逆時針移動約0.5－1圈，即可獲得清晰的物象(切勿用粗調節器!)

熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區別： 1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上； 2.光源為紫外光，波長較短，分辨力高于普通顯微鏡； 3.有兩個特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線，用以保護人

如果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調節，如果需要更換玻片標本時，必須順時針(切勿轉錯方向)轉動粗調節器使鏡臺下降，方可取下玻片標本。

一）正置顯微鏡 1、安放 右手握住鏡臂，左手托住鏡座，使鏡體保持直立。桌面要清潔、平穩，要選擇臨窗或光線充足的地方。單筒的一般放在左側，距離桌邊3～4厘米處。 2、清潔 檢查顯微鏡是否有毛病，是否清潔，鏡身機械部分可用干凈軟布擦拭。透

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光學顯微鏡的樣品要求是什么？

在光學顯微鏡的樣品制備過程中，樣品的切片厚度在2～25um之間；電鏡的切片厚度在50-100nm以內（高壓電鏡除外，其樣品厚度可達到1um），所以采用的切片方法，也不盡相同。

在載體方面，光學顯微鏡的的切片的載體是玻片，而電鏡切片的載體是載網。

在固定方面，光學顯微鏡的切片使用復合固定液固定，而電鏡切片，只用單一固定液進行重復固定

在染色方面，光學樣品的染色較為簡單，根據不同的觀測樣品及光學顯微鏡的類型，通常以固定的一些染色劑染色就行了。而電鏡樣品再染色方面的方法很多，而且也很復雜，比如負染色、銀染色等等。

在包埋方面，光學顯微鏡切片使用石蠟、火棉膠、明膠等做包埋劑；電鏡切片則用環氧樹脂、聚苯乙烯樹脂、異丁烯樹脂及水溶性樹脂等做包埋劑。

為了使顯微鏡的視野能受到均勻而又充分的照明，在顯微鏡初次安裝和調試時，就必須把照明光路系統調整好，這是正確使用顯微鏡，并獲得正確、可*結果的重要手段和最基本的要求。此外，正確掌握照明光路系統的調整，是使用顯微鏡過程中更換光源燈泡后所必經的步驟，也是在日常使用過程中不時地檢驗顯微鏡性能的必要手段。顯微鏡照明光路系統的調整主要有以下4項內容：1．照明光源燈室在顯微外的初步調整① 首先將燈室的外殼打開，壓彈簧夾子將鹵素燈泡裝入插座中，安裝時避免手指直接接觸燈泡（可用柔軟的布或紙隔住），以免燈泡上留有指紋等臟物，影響燈泡的使用壽命。②把燈室擺在桌面上，接通電源后，用專用的螺絲刀調節燈的調焦旋鈕孔（標有“←→”），使燈絲投影在1-2m外的墻上，將燈絲成像調至清晰；然后調節燈的高低位置調節絲孔（標有“──”），使燈絲位置高低適當；再調節燈的左右位置調節螺絲孔（標有“──”），使燈絲左右位置合適。2．光源發光體（燈絲）在顯微鏡內位置的檢驗和校正　目的是為了把發光體的像端端正正地調入物鏡的視域范圍內，從光源的角度去確保顯微鏡的視域受到充分而均勻的照明，這是調整庫勒照明系統的前提條件。需要的基本工具：對中望遠鏡購置顯微鏡時已配備。① 拔掉燈庫內的毛玻璃套筒，把燈室裝回顯微鏡上②選用10×物鏡，開亮光源程序找樣品并調焦清晰，再換用40×物鏡把樣品調焦清晰（40×物鏡可以看清燈絲的全貌）；③把聚光鏡的孔徑光闌和視場光闌均開到最大；④拔掉其中一個目鏡，換上對中望遠鏡，抓住白色部分，另一手伸縮黑色接目鏡，就可在視野中看到燈絲像；⑤如燈絲位置不合適，調“──”孔，把燈絲像沿水平方向調好，調“──”孔，把絲像沿垂直方向調好，直至將燈絲像調至剛好充滿物鏡孔徑的光圓像；⑥調整完畢后，將毛玻璃套筒插回原位，拔掉對中望遠鏡，換回目鏡作下一步調整。以上所述照明光源燈室在顯微鏡外的調整和光源發光體在顯微鏡內位置的校驗，只需在顯微鏡初次安裝調試及更換燈泡時進行，平時使用顯微鏡時不能隨意亂調亂動。萬一調亂時，可按上述步驟調回原狀。3．庫勒照明（Kohler）系統的正確調整　顯微鏡的正確調試，主要工作之一是照明光路系統的調整，而其中的關鍵是庫勒照明系統的調整。對于每一位使用顯微鏡的人員，特別是作顯微照像的人員來說，應該對庫勒照明系統的原理及其調整步驟有一定的了解和掌握，才能充分發揮顯微鏡應有的功能，拍出來的照片才能在效果上比較一致而又完善。庫勒照明系統的原理簡單來說就是：光源發光體上任意一點發出的光，可以照明顯微鏡的視域范圍，而光源發光體上每一點所發出的光匯集起來，在顯微鏡的視域中就實現了非常充分而又均勻的照明。調整庫勒照明系統的目的，是為了使所觀察的視域能獲得均勻而又充分的照明，防止雜散光對照像系統造成影響或干擾，以免照像時在底片形成灰霧。高調整庫勒照明系統的必要部件：視場光闌、可進行合軸調整的聚光鏡系統。① 選用10×物鏡和10×目鏡② 把聚光鏡前端透鏡擺進光路中，孔徑光闌調至適中的位置上（不大不小），再把聚光鏡升到最頂的位置上，聚光鏡轉盤調至明視野“J”位置③ 把視場光闌調至最小（0.1）④ 載物臺上放上已封片的生物樣品，開亮光源，調焦清晰⑤ 視域中會出現一個局部照明的區域或亮斑，這是視場光闌的模糊像，在其中可以清晰地看到樣品的細節；在它之外是較暗的視域，不一定能把樣品的細節看得清楚⑥把聚光鏡微微地向下調，使視野中的亮斑逐漸收小，慢慢變成一個清晰的多邊形象，這便是視場光闌的清晰像；⑦一般情況下，多邊形象并不在視域中央，需要調整聚光鏡的一對調中螺絲，把視場光闌多邊形的像調至中央位置；⑧逐漸開大視場光闌，使多邊形象成為視域的內接多邊形，進一步核對調中的狀況，如對中不夠理想，7a64e4b893e5b19e31333431373839繼續微微調對中螺絲；⑨將視場光闌稍為再微微開大一些，使它的多邊形象恰好消失在視域的邊緣上，至此，庫勒照明系統調整完畢。庫勒照明系統調整好以后，整個視域照明均勻，拍攝的顯微照片明亮清晰，反差正常。在日后使用過程中應特別注意： a. 視場光闌不可任意開大，但可隨物鏡倍數的增大而將視場光闌收小，隨物鏡倍數的減小而開大； b. 聚光鏡的高低位置不準亂調，否則會破壞已調整好的庫勒照明系統； c. 使用10×以下物鏡時要將聚光鏡前端透鏡擺出光路外，使用10×或10×以上物鏡時要將前端透鏡擺入光路中； d. 關于物鏡倍數與視場光闌大小配合問題，在實際使用過程中，作為一般觀察不一定要收小或開大視場光闌，但作顯微照相時，為了避免雜散光線對照相系統的干擾，以便能拍攝到較完善的照片，則應在使用每一個倍數的物鏡時，把視場光闌調節到正好消失于所觀察的視域邊上，這是比較繁復的工作，但又非做不可。較為簡便的方法是把與各個倍數物鏡相對應的視場光闌事先調整好，并作好記號，以后使用時根據記號直接調至相應的位置。4．孔徑光闌的正確使用　由于聚光鏡的孔徑光闌可以影響顯微鏡的分辨率，使用時應掌握正確的使用方法。過去由于對孔徑光闌的認識不足，往往把它當作是調節視野亮度的工具。雖然調節孔徑光闌在一定程度上可以改變視野的亮度，但會直接影響成像的反差、對比度及分辨率，在使用過程中應盡可能避免。為了發揮聚光鏡孔徑光闌的作用，以便在觀察時，尤其在作顯微照相時獲得最佳分辨率，在每換用一個倍數的物鏡時，在樣品調焦清晰后，需要調節孔徑光闌，使它的大小正好等于所用物鏡數值孔徑（物鏡孔徑像）的2/3 。調整方法是用對中望遠鏡對焦于視野中黑色相差環上，調節孔徑光闌，可以看到一個多邊形的孔徑光闌像，然后調到等于物鏡孔徑像的2/3，即介于黑色相差環外與圓形視域內之間。為方便起見，可把與各倍數物鏡相對應的孔徑光闌預先調整好，并作好標記，以免每次使用都要重新調整。

普通光學顯微鏡和熒光顯微鏡的區別有什么？

熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區別：

1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上； 

2.光源為紫外光zhidao，波長較短，分辨力高于普通顯微鏡； 

3.有兩個特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線版，用以保護人目。

熒光顯微鏡也是光學顯微鏡的一種，主要的區別是二者的激發波長不同。由此決定了熒光顯微鏡權與普通光學顯微鏡結構和使用方法上的不同。 　　

熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。它是由光源、濾板系統和光學系統等主要部件組成。是利用一定波長的光激發標本發射熒光，通過物鏡和目鏡系統放大以觀察標本的熒光圖像。

光學顯微鏡的操作步驟及保養方法？

一）正置顯微鏡

1、安放

右手握住鏡臂，左手托住鏡座，使鏡體保持直立。桌面要清潔、平穩，要選擇臨窗或光線充足的地方。單筒的一般放在左側，距離桌邊3～4厘米處。

2、清潔

檢查顯微鏡是否有毛病，是否清潔，鏡身機械部分可用干凈軟布擦拭。透鏡要用擦鏡紙擦拭，如有膠或粘污，可用少量二甲苯清潔之。

3、對光

鏡筒升至距載物臺1～2厘米處，低倍鏡對準通光孔。調節光圈和反光鏡，光線強時用平面鏡，光線弱時用凹面鏡，反光鏡要用雙手轉動。

若使用的為帶有光源的顯微鏡，可省去次步驟，但需要調節光亮度的旋鈕。

4、安裝標本

將玻片放在載物臺上，注意有蓋玻片的一面一定朝上。用彈簧夾將玻片固定，轉動平臺移動器的旋鈕，使要觀察的材料對準通光孔中央。

5、調焦

調焦時，先旋轉粗調焦旋鈕慢慢降低鏡筒，并從側面仔細觀察，直到物鏡貼近玻片標本，然后左眼自目鏡觀察，左手旋轉粗調焦旋鈕抬升鏡筒，直到看清標本物像時停止，再用細調焦旋鈕回調清晰。

操作注意：不應在高倍鏡下直接調焦；鏡筒下降時，應從側面觀察鏡筒和標本間的間距；要了解物距的臨界值。

若使用雙筒顯微鏡，如觀察者雙眼視度有差異，可靠視度調節圈調節。另外雙筒可相對平移以適應操作者兩眼間距。

6、觀察

若使用單筒顯微鏡，兩眼自然張開，左眼觀察標本，右眼觀察記錄及繪圖，同時左手調節焦距，使物象清晰并移動標本視野。右手記錄、繪圖。

鏡檢時應將標本按一定方向移動視野，直至整個標本觀察完畢，以便不漏檢，不重復。

光強的調節：一般情況下，染色標本光線宜強，無色或未染色標本光線宜弱；低倍鏡觀察光線宜弱，高倍鏡觀察光線宜強。除調節反光鏡或光源燈以外，虹彩光圈的調節也十分重要。

（1）低倍鏡觀察

觀察任何標本時，都必須先使用低倍鏡，因為其視野大，易發現目標和確定要觀察的部位。

（2）高倍鏡觀察

從低倍鏡轉至高倍時，只需略微調動細調焦旋鈕，即可使物像清晰。

使用高倍鏡時切勿使用粗調焦旋鈕，否則易壓碎蓋玻片并損傷鏡頭。

轉動物鏡轉換器時，不可用手指直接推轉物鏡，這樣容易使物鏡的光軸發生偏斜，轉換器螺紋受力不均勻而破壞，最后導致轉換器就會報廢。

（3）油鏡的觀察

先用低倍鏡及高倍鏡將被檢物體移至視野中央后，再換油鏡觀察。油鏡觀察前，應將顯微鏡亮度調整至最亮，光圈完全打開。

使用油鏡時，先在蓋玻片上滴加一滴香柏油（鏡油），然后降低鏡筒并從側面仔細觀察，直到油鏡浸入香柏油并貼近玻片標本，然后用目鏡觀察，并用細調焦旋鈕抬升鏡筒，直到看清標本的焦段時停止并調節清晰。

香柏油滴加要適量。油鏡使用完畢后一定要用擦鏡紙沾取二甲苯擦去香柏油，并再用干的擦鏡紙擦去多余二甲苯。

7、結束操作

觀察完畢，移去樣品，扭轉轉換器，使鏡頭V字型偏于兩旁，反光鏡要豎立，降下鏡筒，擦抹干凈，并套上鏡套。

若使用的是帶有光源的顯微鏡，需要調節亮度旋鈕將光亮度調至最暗，再關閉電源按鈕，以防止下次開機時瞬間過強電流燒壞光源燈。

（二）倒置顯微鏡

倒置顯微鏡與正置顯微鏡的主要區別在于物鏡位于載物臺下方，這樣有利于觀察時在上方對樣品進行一些實時操作。

倒置顯微鏡操作過程基本與雙筒的正置顯微鏡相似，需注意以下幾點：

觀察時可調節鉸鏈式雙目目鏡至舒適的位置。

組織培養液或水濺到載物臺上、物鏡上或顯微鏡鏡架上可能會損傷設備。如果濺上后，應該立即從墻上插座拔下電源線，擦去濺出液或水。

一定要輕柔轉動光強調e799bee5baa6e78988e69d8331333264636164節鈕，不要試圖將旋鈕轉過終點位置。使用后一定要先將燈的強度調至最小再關電源。

使用后要旋轉三孔轉換器，使物鏡鏡片置于載物臺下側，防止灰塵的沉降。

（三）實體顯微鏡

又稱體視顯微鏡或解剖顯微鏡。操作步驟基本和雙筒正置顯微鏡類似：

取用解剖鏡時，移動需用雙手，保持穩重。若需連鏡箱搬動，應將鏡箱鎖好，同時鏡箱的鑰匙必須拔除。

鏡管上若有防塵罩，應取下并換上目鏡及眼罩。

將樣品置于玻片上或蠟盤中再放到載物盤上待觀察。擰開鎖緊螺絲，把鏡體先上升到一定高度，然后鎖緊鏡體。

觀察前可先轉動目鏡管以適合眼間距。雙眼視度差異可用視覺圈調節。

對焦時，轉動升降螺絲不能太快或強行扭轉，謹防損壞齒輪。

如需放大觀察，再轉動倍率盤直到所需放大倍率。物像越大，光線越暗，必須調好光源選擇好背景物。

用畢后，先將載物盤上的東西拿走，松開鎖緊螺絲將鏡體放下并鎖緊。取出目鏡并換上防塵罩。將元件全部放回，注意不要與其它鏡互換。用布把鏡身擦干凈，放入鏡箱內，鎖緊鏡箱。

使用普通光學顯微鏡的具體步驟是什么？

一、取鏡

1．右手握住鏡臂，左手托住鏡座。

2．把顯微鏡e5a48de588b67a6431333363396433放在實驗臺上，略偏左。安裝好目鏡和物鏡。 

二、對光

3．轉動轉換器，使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘

米的距離)。

4．把一個較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內(右眼睜開，便于以后同時畫圖)。轉動反光鏡，使光線通過通光孔反射到鏡筒內。通過目鏡，可以看到白亮的視野。 

三、觀察

5．把所要觀察的玻片標本放在載物臺上，用壓片夾壓住，標本要正對通光孔的中心。

6．轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標本為止（眼睛看著物鏡，以免物鏡碰到玻片標本）。

7．左眼向目鏡內看，同時反方向轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。再略微轉動細準焦螺旋，使看到的物像更加清晰。

8、光學顯微鏡

顯微鏡是一種顯微鏡結構精密的光學儀器，已有300多年的發展史。自從有了顯微鏡，人們看到了過去看不到的許多微小生物和構成生物的基本單元--細胞。不僅有能放大千余倍的光學顯微鏡，而且有放大幾十萬倍的電子顯微鏡，使我們對生物體的生命活動規律有了更進一步的認識。在普通中學生物教學大綱中規定的實驗中，大部分要通過顯微鏡來完成，因此，顯微鏡性能的好壞是做好觀察實驗的關鍵。

普通光學顯微鏡和熒光顯微鏡的區別

熒光抄顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區別：

1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上； 

2.光源為紫外光，波長較短，分辨力高于普通顯微鏡； 

3.有兩個特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物百鏡之間的用于濾除紫外線，用以保護人目。

熒光顯微鏡也是光學顯微鏡的一種度，主要的區別是二者的激發波長不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學顯微鏡結構和使用方法上的不同。 　　

熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。它是由光源、濾板系統問和光學系統等主要部件組成。是利用一定波長的光激發標本發射熒光，通過物鏡和目鏡答系統放大以觀察標本的熒光圖像。

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